常用滅菌法
一些基本概念:
無菌:物體或一定介質(zhì)中無任何活的微生物。
滅菌:應(yīng)用物理或化學(xué)等方法將物體上或介質(zhì)中所有微生物及其芽胞全部殺死。
消毒:以物理或化學(xué)等方法殺滅物體上或介質(zhì)中的病原微生物。
防腐:用物理或化學(xué)等方法抑制微生物的生長,亦稱抑菌。
一、物理滅菌法:
熱力滅菌法:
熱滅菌法 利用高溫使微生物細(xì)胞內(nèi)的一切蛋白質(zhì)變性,酶活性消失,致使細(xì)胞死亡。通常有干熱、濕熱和間歇加熱滅菌等法。
干熱滅菌 直接利用火焰將微生物燒死(如燒接種環(huán)、載玻片和試管口等)。不能用火焰滅菌的物品則利用熱空氣滅菌,將物品放在烘箱中加熱到160~170℃,持續(xù)90分鐘,此法適用于玻璃、金屬和木質(zhì)的器皿。
濕熱滅菌 以沸水、蒸氣和蒸氣加壓滅菌。巴氏滅菌法就是濕熱滅菌,此法有兩種方式,①低溫長時間處理:在61.7~62.8℃下處理30分鐘;②高溫短時間處理:在71.6℃或略高溫度下處理15分鐘。在上述諸法中,以蒸氣加壓滅菌效果最好,可用常壓蒸氣滅菌,也可在高壓蒸氣鍋中(一般使用1千克/厘米2)滅菌,其蒸氣溫度可達(dá)121℃,能將耐熱的芽孢在30分鐘內(nèi)全部殺死。但對某些易被高壓破壞的物質(zhì),如某些糖或有機含氮化合物,宜在0.6千克/厘米2壓力下(110℃)滅菌15~30分鐘 (1)熱壓滅菌法:用飽和水蒸汽排盡空氣后,在一定溫度和壓力下進行滅菌。水蒸汽壓力與溫度對應(yīng)如下:
20.594(kpa)-105.7℃,34.3233-108.8℃,41.1879-110.3℃,68.6466-115.5℃,75.1121-116.8℃,96.1052-120.2℃......
(2)流通蒸汽滅菌法和煮沸滅菌法:100℃,適用于不耐高溫的藥劑。
(3)低溫間歇滅菌法:80℃加熱1小時,20~25℃下放置24小時,連續(xù)操作三次以上,適用于不耐熱藥劑,滅菌效果差,須加防腐劑。滅菌設(shè)備的驗證是通過有關(guān)參數(shù)對滅菌方法進行可靠性驗證的。
1、D值
D值是指在一定溫度下,殺滅90%微生物(或殘存率為10%)所需的滅菌時間。在一定滅菌條件下,不同微生物具有不同的D值;同一微生物在不同滅菌條件下,D值亦不相同。因此D值隨微生物的種類、環(huán)境和滅菌溫度變化而異。
2、Z值
Z值是指滅菌時間減少到原來的1/10所需升高的溫度或在相同滅菌時間內(nèi),殺滅99%的微生物所需提高的溫度。
3、F值
F值為在一定溫度(T)下,給定Z值所產(chǎn)生的滅菌效果與在參比溫度(T0)下給定Z值所產(chǎn)生的滅菌效果相同時,所相當(dāng)?shù)臏缇鷷r間,以min為單位。F值常用于干熱滅菌。
4、F0值
F0值為一定滅菌溫度(T)下,Z為10℃時所產(chǎn)生的滅菌效果與121℃,Z值為10℃所產(chǎn)生的滅菌效果相同時所相當(dāng)?shù)臅r間(min)。也就是說,不管溫度如何變化,t分鐘內(nèi)的滅菌效果相當(dāng)于在121℃下滅菌F0 分鐘的效果。F0目前僅應(yīng)用于濕熱滅菌。濾滅菌法: 1、垂熔玻璃濾器:國際標(biāo)準(zhǔn)為P250~P2,濾過粒子由大到小。P2可濾除大腸桿菌及葡萄球菌。
2、微孔濾膜:我國為醋酸纖維素酯濾膜,或硝酸纖維素酯與醋酸纖維素酯的混合纖維素酯濾膜。特性:耐120℃30分鐘滅菌;無脫屑;不耐堿;不耐有機溶劑;易燃。孔徑 5.0mm用于注射液初濾,0.8mm用于精濾,0.45mm可濾去大多數(shù)細(xì)菌,0.15mm可濾去熱原。紫外線滅菌法:波長200~300nm,易穿透潔凈的水和空氣,用于空氣和物體表面滅菌。紫外線燈有效使用期一般為3000小時。紫外線照射時間對微生物殺滅率見表:微波滅菌法:為300~3000兆赫的電磁波。水可強烈吸收微波,使極性分子轉(zhuǎn)動摩擦而產(chǎn)熱。能穿透物質(zhì)較深部,滅菌效果好。有望用于注射液的滅菌。射滅菌法:又稱電離輻射,是用g-射線或b-射線照射殺菌。前者由鈷-60或銫-137發(fā)出,穿透力強;后者由電子加速器產(chǎn)生,帶電荷,穿透力弱,滅菌效果差。對于輻射,無芽胞菌比有芽胞菌敏感得多;無芽胞菌中革蘭氏陰性菌比陽性菌敏感;而病毒敏感性很差。此外,輻射能引起一些藥物pH值、含量、活性等改變,某些制品不宜選用。
滲透壓滅菌利用高滲透壓溶液進行滅菌的方法。在高濃度的食鹽或糖溶液中細(xì)胞因脫水而發(fā)生質(zhì)壁分離,不能進行正常的新陳代謝,結(jié)果導(dǎo)致微生物的死亡。
二、化學(xué)滅菌法:大多數(shù)化學(xué)藥劑在低濃度下起抑菌作用,高濃度下起殺菌作用。常用5%石炭酸、70%乙醇和乙二醇等。化學(xué)滅菌劑必須有揮發(fā)性,以便清除滅菌后材料上殘余的藥物,一般以噴灑(霧)、蒸發(fā)等方法進行滅菌。
(一)環(huán)氧乙烷:無色醚樣臭味氣體,沸點10.8℃,沸點以下為無色透明液體,比重0.882,溶于水。擴散穿透能力強,屬廣譜殺菌劑。用于對熱敏感的藥物、塑料、橡膠、皮革制品、皮料、紙張以及小型玻璃器皿等的滅菌。
(二)過氧乙酸:無色透明液體,有刺激性醋酸臭和味,易揮發(fā),有腐蝕性。易溶于水、乙醇、乙醚、醋酸。可緩慢分解,急劇分解時會爆炸。但40%以下的溶液則不會。本品廣譜、高效、速效,毒性低,0.5%溶液用于空氣(噴霧30ml/m3)、器械和皮膚消毒,臨用前配制。
(三)其它:
1、苯酚(石炭酸):3~5%地面、墻壁噴撒。
2、甲酚皂溶液(來蘇爾):5~100%地面、墻壁噴撒。
3、甲醛溶液(福爾馬林):20ml/m3加熱蒸發(fā),6~12小時。
4、乳酸:1ml/m3加熱蒸發(fā)0.5~1小時。
5、苯扎溴銨:1/1000~1/2000溶液噴撒地面、墻壁。
6、丙二醇:1ml/m3加熱蒸發(fā)。
電話號碼:0571-81604278 傳真號碼:0571-81604276
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